ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR) เป็นเทคนิคที่สำคัญในชีววิทยาโมเลกุลทำให้สามารถขยายส่วน DNA เฉพาะสำหรับการใช้งานต่าง ๆ เช่นการโคลนนิ่งยีนการทดสอบทางพันธุกรรมและการวินิจฉัยโรค คุณภาพของน้ำที่ใช้ใน PCR มีความสำคัญเนื่องจากสารปนเปื้อนสามารถยับยั้งปฏิกิริยาหรือแนะนำผลลัพธ์ที่ผิดพลาด ในฐานะซัพพลายเออร์ของระบบน้ำ Lab EDI (อิเล็กโทรดไอโซโทป) ฉันมักจะถูกถามว่าระบบของเราสามารถใช้สำหรับ PCR ได้หรือไม่ ในโพสต์บล็อกนี้ฉันจะสำรวจข้อกำหนดสำหรับน้ำเกรด PCR ความสามารถของระบบน้ำในห้องปฏิบัติการ EDI ของเราและความเหมาะสมของผลิตภัณฑ์ของเราสำหรับแอปพลิเคชัน PCR
ข้อกำหนดสำหรับน้ำเกรด PCR
ปฏิกิริยา PCR มีความไวสูงต่อสารปนเปื้อนที่มีอยู่ในน้ำ แม้แต่การติดตามปริมาณสิ่งสกปรกก็อาจส่งผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญต่อประสิทธิภาพและความแม่นยำของปฏิกิริยา ต่อไปนี้เป็นข้อกำหนดหลักสำหรับน้ำเกรด PCR:
ปริมาณไอออนิกต่ำ
ไอออนเช่นโซเดียมโพแทสเซียมแคลเซียมและแมกนีเซียมสามารถรบกวนปฏิกิริยา PCR โดยส่งผลกระทบต่อกิจกรรมของเอนไซม์ดีเอ็นเอโพลีเมอเรส ความแข็งแรงของไอออนิกสูงยังสามารถทำให้เกิดการผูกมัดเฉพาะของไพรเมอร์และเทมเพลต DNA ซึ่งนำไปสู่ผลิตภัณฑ์การขยายเท็จ ดังนั้นน้ำเกรด PCR ควรมีปริมาณไอออนิกต่ำโดยทั่วไปจะมีความต้านทานอย่างน้อย 18.2 MΩ·ซม.


ปริมาณออร์แกนิกต่ำ
สารปนเปื้อนอินทรีย์เช่นโปรตีนกรดนิวคลีอิกและคาร์โบไฮเดรตสามารถยับยั้งปฏิกิริยา PCR โดยการจับกับเอนไซม์ดีเอ็นเอโพลีเมอเรสหรือแข่งขันกับไพรเมอร์เพื่อจับกับเทมเพลต DNA น้ำเกรด PCR ควรมีปริมาณอินทรีย์ต่ำโดยทั่วไปจะมีคาร์บอนอินทรีย์ทั้งหมด (TOC) น้อยกว่า 5 ppb
ระดับเอนโดท็อกซินและนิวเคลียสต่ำ
เอนโดท็อกซินคือ lipopolysaccharides ที่พบในผนังเซลล์ของแบคทีเรียแกรมลบ พวกเขาสามารถทำให้เกิดการอักเสบและการตอบสนองของภูมิคุ้มกันในสิ่งมีชีวิตและยังสามารถรบกวนปฏิกิริยา PCR โดยการยับยั้งเอนไซม์ดีเอ็นเอโพลีเมอเรส เอนไซม์นิวเคลียสสามารถลดเทมเพลต DNA และไพรเมอร์ซึ่งนำไปสู่การสูญเสียประสิทธิภาพการขยาย น้ำเกรด PCR ควรมี endotoxin ต่ำและระดับนิวเคลียสโดยทั่วไปจะมี endotoxin น้อยกว่า 0.03 EU/mL น้อยกว่าและระดับนิวเคลียสที่ตรวจไม่พบ
ความสามารถของระบบน้ำ Lab EDI
EDI เป็นกระบวนการทำให้บริสุทธิ์น้ำปลอดสารเคมีที่รวมการแลกเปลี่ยนไอออนและอิเล็กโทรไลซิสเพื่อกำจัดไอออนออกจากน้ำ ระบบน้ำในห้องปฏิบัติการ EDI ของเราได้รับการออกแบบมาเพื่อผลิตน้ำคุณภาพสูงซึ่งตรงตามข้อกำหนดที่เข้มงวดของการใช้งานในห้องปฏิบัติการที่หลากหลายรวมถึง PCR นี่คือคุณสมบัติที่สำคัญและความสามารถของระบบน้ำในห้องปฏิบัติการ EDI ของเรา:
ความต้านทานสูง
ระบบน้ำในห้องปฏิบัติการ EDI ของเรามีความสามารถในการผลิตน้ำที่มีความต้านทานสูงถึง 18.2 MΩ·ซม. ซึ่งตรงตามข้อกำหนดสำหรับปริมาณไอออนิกต่ำในน้ำเกรด PCR ความต้านทานสูงนั้นเกิดขึ้นได้จากการรวมกันของเรซินแลกเปลี่ยนไอออนและเยื่อหุ้มอิเล็กโทรไลซิสซึ่งกำจัดไอออนออกจากน้ำสู่ระดับต่ำมาก
ปริมาณออร์แกนิกต่ำ
นอกเหนือจากการกำจัดไอออนแล้วระบบน้ำในห้องปฏิบัติการ EDI ของเรายังมีตัวกรองคาร์บอนที่เปิดใช้งานและเยื่อหุ้มกรองกรองเพื่อกำจัดสารปนเปื้อนอินทรีย์ออกจากน้ำ ตัวกรองเหล่านี้สามารถกำจัดโปรตีนกรดนิวคลีอิกและคาร์โบไฮเดรตได้อย่างมีประสิทธิภาพเพื่อให้แน่ใจว่าน้ำมีปริมาณอินทรีย์ต่ำ TOC ของน้ำที่ผลิตโดย Lab EDI Water Systems ของเรามักจะน้อยกว่า 5 ppb ซึ่งตรงตามข้อกำหนดสำหรับน้ำเกรด PCR
ระดับเอนโดท็อกซินและนิวเคลียสต่ำ
ระบบน้ำในห้องปฏิบัติการ EDI ของเราได้รับการออกแบบมาเพื่อลดการปรากฏตัวของเอนโดท็อกซินและนิวเคลียสในน้ำ น้ำถูกส่งผ่านชุดของตัวกรองและเยื่อหุ้มเซลล์ที่กำจัดแบคทีเรียและจุลินทรีย์อื่น ๆ ลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนของเอนโดท็อกซิน นอกจากนี้น้ำยังได้รับการบำบัดด้วยแสงอัลตราไวโอเลตเพื่อยับยั้งจุลินทรีย์และนิวเคลียสที่เหลืออยู่ ระดับเอนโดท็อกซินและนิวเคลียสของน้ำที่ผลิตโดยระบบน้ำในห้องปฏิบัติการของเรามักจะต่ำมากตามข้อกำหนดสำหรับน้ำเกรด PCR
ความเหมาะสมของระบบน้ำในห้องปฏิบัติการ EDI ของเราสำหรับ PCR
ตามข้อกำหนดสำหรับน้ำเกรด PCR และความสามารถของระบบน้ำในห้องปฏิบัติการ EDI ของเราฉันสามารถพูดได้อย่างมั่นใจว่าระบบของเราเหมาะสำหรับการใช้งาน PCR นี่คือเหตุผลบางประการว่าทำไม:
การผลิตน้ำคุณภาพสูง
ระบบน้ำในห้องปฏิบัติการ EDI ของเราได้รับการออกแบบมาเพื่อผลิตน้ำคุณภาพสูงซึ่งตรงตามข้อกำหนดที่เข้มงวดของ PCR น้ำมีปริมาณไอออนิกต่ำปริมาณอินทรีย์ต่ำและระดับเอนโดท็อกซินต่ำและนิวเคลียสเพื่อให้แน่ใจว่าจะไม่รบกวนปฏิกิริยา PCR หรือแนะนำผลลัพธ์ที่ผิดพลาด
ความสม่ำเสมอและความน่าเชื่อถือ
ระบบน้ำในห้องปฏิบัติการ EDI ของเราถูกสร้างขึ้นด้วยส่วนประกอบที่มีคุณภาพสูงและเทคโนโลยีขั้นสูงทำให้มั่นใจได้ว่าการผลิตน้ำที่สอดคล้องและเชื่อถือได้ ระบบนี้มีเซ็นเซอร์และคอนโทรลเลอร์ที่ตรวจสอบคุณภาพน้ำแบบเรียลไทม์และปรับกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ตามที่จำเป็นเพื่อรักษาคุณภาพน้ำที่ต้องการ สิ่งนี้ทำให้มั่นใจได้ว่าน้ำที่ผลิตโดยระบบของเรานั้นมีคุณภาพสูงสุดเสมอให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ในแอปพลิเคชัน PCR
โซลูชันที่ปรับแต่งได้
เราเข้าใจว่าห้องปฏิบัติการที่แตกต่างกันมีข้อกำหนดที่แตกต่างกันสำหรับคุณภาพน้ำและปริมาณ นั่นเป็นเหตุผลที่เรานำเสนอระบบน้ำ Lab EDI ที่หลากหลายเพื่อตอบสนองความต้องการเฉพาะของลูกค้าของเรา ของเราระบบน้ำที่ปราศจากไอออนซีรีย์ขนาดกลางเหมาะสำหรับห้องปฏิบัติการขนาดกลางที่มีความต้องการน้ำปานกลางในขณะที่ของเราระบบน้ำที่ปราศจากไอออนซีรี่ส์ BASIC-Qเหมาะอย่างยิ่งสำหรับห้องปฏิบัติการขนาดเล็กที่มีพื้นที่ จำกัด และงบประมาณ สำหรับห้องปฏิบัติการขนาดใหญ่ที่มีความต้องการน้ำสูงเราเสนอระบบน้ำที่ปราศจากไอออนซึ่งสามารถผลิตน้ำที่มีคุณภาพสูงถึง 100 ลิตรต่อชั่วโมง
บทสรุป
โดยสรุประบบน้ำในห้องปฏิบัติการ EDI ของเราเหมาะสำหรับการใช้งาน PCR พวกเขามีความสามารถในการผลิตน้ำคุณภาพสูงที่ตรงกับข้อกำหนดที่เข้มงวดของน้ำเกรด PCR รวมถึงปริมาณไอออนิกต่ำเนื้อหาอินทรีย์ต่ำและเอนโดท็อกซินต่ำและระดับนิวเคลียส ระบบยังมีความสอดคล้องเชื่อถือได้และปรับแต่งได้ซึ่งเป็นโซลูชั่นที่คุ้มค่าสำหรับห้องปฏิบัติการทุกขนาด
หากคุณมีความสนใจในการเรียนรู้เพิ่มเติมเกี่ยวกับระบบน้ำในห้องปฏิบัติการ EDI ของเราหรือต้องการหารือเกี่ยวกับความต้องการการทำให้บริสุทธิ์โดยเฉพาะของคุณโปรดติดต่อเรา ทีมผู้เชี่ยวชาญของเรายินดีที่จะช่วยคุณค้นหาทางออกที่เหมาะสมสำหรับห้องปฏิบัติการของคุณ
การอ้างอิง
- Sambrook, J. , & Russell, DW (2001) การโคลนนิ่งโมเลกุล: คู่มือห้องปฏิบัติการ สำนักพิมพ์ห้องปฏิบัติการ Cold Spring Harbour
- Innis, MA, Gelfand, DH, Sninsky, JJ, & White, TJ (eds.) (1990) โปรโตคอล PCR: คำแนะนำเกี่ยวกับวิธีการและแอปพลิเคชัน สื่อวิชาการ
- วัตสัน, JD, & Crick, FHC (1953) โครงสร้างโมเลกุลของกรดนิวคลีอิก; โครงสร้างสำหรับกรดนิวคลีอิก deoxyribose ธรรมชาติ, 171 (4356), 737-738




